Poslední úprava: RNDr. Irena Lichá, CSc. (27.05.2021)
V tomtočtyřdenním praktickém kurzu se účastníci seznámí s molekulárním klonováním genů od in silico návrhu
klonovací strategie po vložení vybraného genu do expresního vektoru plasmidového typu s následným ověřením
vzniklého konstruktu pomocí klasických molekulárně biologických metod (PCR, štěpení pomocí restrikčních
endonukleáz případně sekvenování). Poté se účastníci kurzu pokusí exprimovat vybraný protein v bakteriálním
expresním systému. Tato část praktického kurzu zahrnuje vnesení vytvořeného plasmidového konstruktu do
zvoleného organismu a následnou indukci systému za účelem produkce vybraného proteinu včetně následné
analýzy pomocí PAAGE elektroforézy.
Poslední úprava: RNDr. Irena Lichá, CSc. (14.05.2021)
In this three-day practical course, participants will learn basic molecular cloning techniques from in silico cloning
strategy to the practical molecular cloning of the selected gene into a plasmid-type expression vector with
subsequent verification of the construct using classical molecular biological methods (PCR, restriction
endonuclease digestion or sequencing). Then the course participants will try to express the selected protein in a
bacterial expression system. This part of the practical course includes the electroporation of the constructed
plasmid into the appropriate bacterial strain and the subsequent induction of the expression system to produce
the selected protein, including the subsequent analysis of protein production by PAAGE electrophoresis.
