Poslední úprava: RNDr. Helena Kulíková (06.10.2020)
Technika suchých nátěrů, manipulace s laboratorní myší
- krevní roztěr, tlustá kapka
- nátěry z kultur prvoků (trichomonády)
- barvení suchých nátěrů metodou Giemsy-Romanowského
- rychlé barvení Dade Diff-Quik
- manipulace s laboratorní myší, pasážování Trypanosoma brucei, Plasmodium berghei
- zmražovací techniky, kryoprezervace prvoků
Fluorescenční barvící metody
- vitální barvení acridinovou oranží
- jaderné barvení Hoechstem nebo DAPI
- fluorescenční sondy citlivé k pH
- značení FITC
- imunofluorescence
Základní kultivační technika
- příprava zásobních roztoků antibiotik
- izolace axenické kultury Tritrichomonas foetus pomocí migrační rourky
- pasážování axenických kultur, zkouška sterility
Klonování
- izolace klonů zřeďovací metodou (Tetrahymena pyriformis)
- izolace klonů metodou mezního ředění (Trichomonas vaginalis)
- izolace klonů bičíkovců z čeledi Trypanosomatidae na agarových plotnách
Kvantitativní práce s prvoky
- práce s Burkerovou počítací komůrkou
- výpočet koncentrace buněk
- kvantitativní nasazení růstového pokusu
- vyhodnocení růstového pokusu
ELISA
- využití v diagnostice
- test na přítomnost protilátek proti Toxoplasma gondii
PCR
- využití v diagnostice
- test na přítomnost lidských patogenů/komensálů
- detekce DNA na gelech
- elektroforetické metody
Příprava a izolace rekombinantního proteinu
- práce s bakteriální kulturou, podmínky indukce a exprese cizorodého proteinu
- izolace proteinu v nativní a denaturované formě afinitní chromatografií
- analýza proteinového vzorku elektroforézou
- elektroforetické metody
Experimentální sání na modelu Trypanosoma culicavium – Culex p. quinquefasciatus
-příprava kultury, počítání v komůrce, ředění kultury
-deaktivace krve v teplé lázni, příprava krmítka s membránou
-sání
-pitva dříve nasátých komárů
-fixace a barvení pozitivních preparátů
V roce 2020 bude zavedena další úloha týkající se helmintologie.
Poslední úprava: doc. RNDr. Ivan Hrdý, Ph.D. (17.09.2020)
Staining methods, manipulation with laboratory mouse
- blood smear, thick drop
- staining of dry smears by Giemsy-Romanowski method
- fast staining by Dade Diff-Quik
- manipulation with laboratory mouse, infection with Trypanosoma brucei, Plasmodium berghei
Fluorescent staining methods
- vital staining with acridine orange
- nuclear staining by Hoechst or DAPI
- pH sensitive fluorescent probes
- FITC labeling
- immunofluorescence on wet mounts
Basic cultivation techniques
- preparation of antibiotic stock solutions
- isolation of the Tritrichomonas foetus axenic culture using a migration tube
- passage of axenic cultures, sterility test
- freezing techniques, cryopreservation of protozoa
Cloning
- Isolation of clones by dilution method (Tetrahymena pyriformis)
- isolation of clones by limiting dilution method (Trichomonas vaginalis)
- isolation of clones on agar plates (Crithidia fasciculata)
Quantitative work with protists
- Work with Burker's counting chamber
- calculation of cell concentration
- evaluation of the growth experiment, calculation of doubling time from growth curves
ELISA
- use in diagnostics
- test for the presence of antibodies against Toxoplasma gondii
PCR
- use in diagnostics
- PCR test for human pathogens / commensals
- DNA isolation methods
- DNA electrophoresis, visualization
Preparation and isolation of recombinant protein
- work with bacterial culture, conditions of induction and expression of foreign protein
- protein isolation in native and denatured form by affinity chromatography
- analysis of protein sample by electrophoresis
- electrophoretic methods
In 2020, new methods will be introduced from the insect vector and helminthology fields.