Přednáška se zabývá vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC), jednou z nejčastěji používaných separačních
metod v současné analytické chemii. Posluchači získají vedle nezbytného teoretického základu i ucelenou představu o
praktickém využití této metody. Cyklus je zahájen připomenutím základních pojmů, retenčních charakteristik a vztahů mezi
nimi. Následuje přehled běžných separačních systémů a mechanismů retence, které se v nich uplatňují. Značná pozornost
je věnována instrumentaci, zejména popisu a funkci jednotlivých komponent HPLC systému. Posluchači jsou seznámeni s
vývojem HPLC v posledních letech a s nejnovějšími trendy. Dvě přednášky jsou věnovány využití HPLC v každodenní
praxi, je podán přehled hlavních aplikačních oblastí této separační metody. Cyklus je uzavřen exkurzí na pracoviště s
rutinním HPLC provozem.
Pro pochopení přednášené problematiky je vyžadováno absolvování přednášky MC230P05N Separační metody nebo
MC230P51 Separační metody KATA.
Poslední úprava: Nesměrák Karel, doc. RNDr., Ph.D. (22.05.2015)
The lecture focuses on high-performance liquid chromatography (HPLC), one of the most frequently used separation
technique in current analytical chemistry. The students will learn the theoretical fundamentals and get a comprehensive
picture about practical usage of the method. The lecture series is prefaced by basic terms, retention characteristics and
mechanisms taking effects. A considerable attention is paid to the instrumentation, particularly to the description of individual
components of the HPLC systems. The students will learn about development of HPLC in recent years and the newest
trends in the field. The next lectures are focused on HPLC daily practice and an overview about the main application areas
is given. The lecture series is closed by an excursion to routine HPLC laboratory.
Poslední úprava: Nesměrák Karel, doc. RNDr., Ph.D. (22.05.2015)
Literatura -
Věra Pacáková, Karel Štulík, Vysokoúčinná kapalinová chromatografie, Univerzita Karlova 1990;
Karel Štulík, Věra Pacáková, Elektroanalytická měření v proudících kapalinách, SNTL Praha, 1989.
Karel Štulík, Věra Pacáková, Electroanalytical Measurements in Flowing Liquids, E.Horwood, Chichester, 1987.
Další materiály ke stažení: http://web.natur.cuni.cz/~analchem/bosakova/index.html
http://web.natur.cuni.cz/~kozlik/
Poslední úprava: Nesměrák Karel, doc. RNDr., Ph.D. (22.05.2015)
Věra Pacáková, Karel Štulík, Vysokoúčinná kapalinová chromatografie, Univerzita Karlova 1990;
Karel Štulík, Věra Pacáková, Elektroanalytická měření v proudících kapalinách, SNTL Praha, 1989.
Karel Štulík, Věra Pacáková, Electroanalytical Measurements in Flowing Liquids, E.Horwood, Chichester, 1987.
Další materiály ke stažení: http://web.natur.cuni.cz/~analchem/bosakova/index.html
http://web.natur.cuni.cz/~kozlik/
Poslední úprava: Nesměrák Karel, doc. RNDr., Ph.D. (28.10.2019)
Požadavky ke zkoušce -
Zkouší se vše, co bylo odpřednášeno, zkouška probíhá písemnou formou.
Poslední úprava: Nesměrák Karel, doc. RNDr., Ph.D. (22.05.2015)
Everything has been tested, written examination.
Poslední úprava: Nesměrák Karel, doc. RNDr., Ph.D. (28.10.2019)
Sylabus -
vyžadováno absolvování přednášky C230P05N: Separační metody nebo C230P51: Separační metody (kata)
1. Úvod do HPLC, její význam a aplikace, srovnání s dalšími separačními technikami. Obecné schéma a součásti vysokoúčinného kapalinového chromatografu. Základní pojmy a definice. Typy interakcí analytů, separační systémy.
6. Detekce: Principy detekce v HPLC, detektory, jejich konstrukce a parametry.
7. Kvalitativní vs. kvantitativní analýza v HPLC.
8. Praxe HPLC: Příprava vzorků, mobilních fází, obsluha a údržba přístroje a řešení problémů. HPLC systémy na trhu.
9. Aplikace HPLC ve farmaceutické analýze, analýze potravin a životního prostředí.
10. Aplikace HPLC v analýze biomolekul a makromolekul.
11. Trendy v moderní HPLC, Vícedimenzionální separační systémy. Miniaturizace, mikrofluidní systémy. Nové typy stacionárních fází a jejich vlastnosti.
12. Exkurze na pracoviště rutinně používající HPLC - společnost Quinta Analytica.
Poslední úprava: Nesměrák Karel, doc. RNDr., Ph.D. (22.05.2015)
successful passing of lectures C230P05N: Separation methods or C230P51: Separation methods (kata) is required before entering this course
1.Introduction to HPLC, its importance and practical application, comparison to other separation methods. General scheme and pieces of HPLC equipment. Basic terms and definitions. Types of analytes' interactions, separation systems.
2. Kinetic and thermodynamic aspects of separation in HPLC. Distribution constant, retention factor, performance of chromatographic column, band broadening, peak shapes, chromatographic resolution.
3. Separation systems: Normal-phase and reversed-phase chromatography.
6. Detection: Principles of detection in HPLC; detectors, their construction and parameters.
7. Qualitative and quantitative analysis in HPLC.
8. Practical aspects of HPLC : Samples' and mobile phases' preparation, operation and service of HPLC instrument, problem solving. Commercially available HPLC equipments.
9. Aplications of HPLC in pharmaceutical analysis, food and beverage analysis, environmental analysis.
10. Aplication of HPLC in analysis of bio/macromolecules.
11. Modern trends in HPLC. Multidimensional separation systems. Miniaturization, microfluid systems. New types of stationary phases and their properties.
