Poslední úprava: doc. RNDr. Magdaléna Krulová, Ph.D. (05.10.2023)
Cílem cvičení je úvod do základních imunologických metod aktivní prací v laboratorních podmínkách.
Určeno pro zájemce o imunologické metodiky, vhodné jako doplněk přednášky z Imunologie. Doporučený ročník 2. a 3. po absolutoriu praktik z Buněčné biologie a Histologie. Praktikum je čtyřdenn
Poslední úprava: doc. RNDr. Magdaléna Krulová, Ph.D. (24.02.2021)
Aim of this course is the introduction to some general methods used in immunological research by using them actively in the lab. All lectures are given in English. Attendance at this course assumes a basic knowledge of immunology, graduation of practical courses of Cell Biology and Histology is recommended.
Literatura
Poslední úprava: doc. RNDr. František Půta, CSc. (14.06.2012)
Pro absolvování praktického cvičení není doporučena speciální literatura - všichni zapsaní studenti dostávají elektronickou verzi protokolů s návody a teorií minimálně dva týdny před vstupem do praktika. Součástí praktického cvičení je detailní seznámení s prováděnými experimenty, teorií imunologických metod, způsoby interpretace výsledků.
Požadavky ke zkoušce
Poslední úprava: doc. RNDr. Magdaléna Krulová, Ph.D. (18.03.2019)
Pro získání zápočtu je nezbytné připravit elektronický protokol obsahující výsledky a interpretace všech provedených experimentů. Tento protokol je následně hodnocen, v případě nesrovnalosti je doplněn do stavu, kdy je možné jej ohodnotit zápočtem. Další podmínkou je příprava posteru shrnující výsledky získané v praktických cvičeních.
Sylabus -
Poslední úprava: doc. RNDr. Magdaléna Krulová, Ph.D. (18.03.2019)
1. Seznámení se s imunologicky významnými orgány a tkáněmi na modelu myši, příprava populací buněk imunitního systému (peritoneální makrofágy, splenocyty, T-lymfocyty, buňky kostní dřeně). 2. Kultivace těchto buněk, diferenciace (kostní dřeň pomocí GM-CSF v dendritické buňky), aktivace, stanovení buněčných populací pomocí průtokové cytometrie 3. Příprava imunofluorescenčních preparátů pro mikroskopii 4. Separace proteinů a následná detekce pomocí Western blotingu, ELISA, Dot-blot, barvení stříbrem, izolace IgG pomocí proteinu A, 5. Detekce antigenů fluorescenční mikroskopií, práce s invertovaným fluorescenčním mikroskopem. 6. Genotypizace DNA
Poslední úprava: doc. RNDr. Magdaléna Krulová, Ph.D. (24.02.2021)
1. Introduction of immunologically important organs and tissues at the mouse model, preparation of immune cell populations 2. Culture of these cells, their differentiation and activation 3. Histological staining of dry imprints and smear samples 4. Fluorescent staining and flow cytometry 5. Immunoglobin isolation, protein electrophoresis, western blotting 6. ELISA 7. Indirect immunofluorescence,microscopy 8. NO assay