Last update: Ing. Lucie Němcová, Ph.D. (08.04.2024)
Historical review, Oogenesis and folliculogenesis, Spermatogenesis, Spermiogenesis, Transcription and translation in germinal cells, Oocyte maturation and fertilization, Molecular biology methodologies, Embryo development, Overview of different types of development, mouse embryonic development, gene expression in early embryonic development chromatin structure, Embryonic stem cells, RNA interference, Vertebrate cloning, Transgenic and GMO animals, Visit of laboratories of Institute of Animal Physiology and Genetics AS CR Libechov
Last update: Ing. Lucie Němcová, Ph.D. (08.04.2024)
1. Představení předmětu, průběh přednášek a zkoušky, historický přehled oboru.
2. Samičí pohlavní buňka – vývoj zárodečných buněk v prenatálním období: primordiální zárodečné buňky, oogonie a oocyty. Regulace folikulogeneze gonadotropními hormony a růstovými faktory -infomace o současných znalostech o gametogenezi zejména hospodářských zvířat.
3. Samčí pohlavní buňka - spermatogonie, spermatogeneze, spermiogeneze - morfologicke a funkcni zmeny, ustaveni a ztrata oplozovaci schopnosti in vivo a in vitro.
4. Zrání a oplození oocytů savců in vitro - metody kultivace, složení kultivačních médií, podmínky in vitro kultivace.
5. Preimplantační vývoj embrya - přehled různých typů vývoje, embryonální vývoj myši, genová exprese v časném embryonálním vývoji, struktura chromatinu vývoji, struktura chromatinu, mRNA, rRNA, nukleolární proteiny.
6. Embryonální kmenové buňky - isolace kmenových buněk z časného embrya, cílená změna genomu (gene targeting, knock-out experiment, knock-in), tvorba chimérních myší, drobná změna genomu (hit and run), Cre-recombinase, Zinc-finger, TALEN, CRISPR/Cas9.
7. Klonování obratlovců - historie a přehled klonování obratlovců, Ian Wilmut - ovečka Dolly, schéma klonování, experiment klonování skotu, využití.
8. Epigenetické změny v průběhu oogeneze a embryogeneze – ART.
9. Metodiky molekulární biologie – genová exprese – RNA – autoradiografie, Nothern Blot, PCR, reverzní transkripce, real-time RT-PCR, mikročipy, NGS.
10. Metodiky molekulární biologie – genová exprese – protein – WB, imunofluorescence.
11. RNA interference - mechanismus RNAi, Dicer, RISC, miRNA, využití RNAi ve vývojové biologii, design siRNA, přenos dsRNA.
12. Návštěva laboratoří Ústavu živočišné fyziologie a genetiky AV ČR Liběchov.