Vývoj techniky pro transfer genů do T-lymfocytů pomocí polyomavirových struktur a peptidu LAH4
| Thesis title in Czech: | Vývoj techniky pro transfer genů do T-lymfocytů pomocí polyomavirových struktur a peptidu LAH4 |
|---|---|
| Thesis title in English: | Development of a technique for gene transfer into T-lymphocytes using polyomavirus structures and the LAH4 peptide |
| Key words: | polyomavirus, VLP, LAH4, doprava genů, T-lymfocyt |
| English key words: | polyomavirus, VLP, LAH4, gene delivery, T-lymphocyte |
| Academic year of topic announcement: | 2018/2019 |
| Thesis type: | diploma thesis |
| Thesis language: | čeština |
| Department: | Department of Genetics and Microbiology (31-140) |
| Supervisor: | RNDr. Hana Španielová, Ph.D. |
| Author: | hidden - assigned by the advisor |
| Date of registration: | 16.11.2018 |
| Date of assignment: | 02.12.2018 |
| Date of electronic submission: | 07.08.2020 |
| Date of proceeded defence: | 10.09.2020 |
| Opponents: | Mgr. Václav Vopálenský, Ph.D. |
| Preliminary scope of work |
| Diplomový projekt se bude soustředit na optimalizace experimentálních přístupů, které mohou být použity pro transfekce obtížně transfekovatelných buněčných linií (např. T-lymfocytů). Vychází z poznatků laboratoře, kde byly identifikovány faktory (pH, fosforylace caspsidových proteinů, specifické peptidy), které napomáhají virové infekci myšího polyomaviru a jsou současně vyvíjeny metody, jak využít virům podobné částice (VLPs) polyomavirů a papilomavirů pro dopravu genů a látek do buněk. Práce se bude soustředit na kandidátní antimikrobiální peptid LAH4. Cílem práce bude: 1) ověřit možnost, že vytipovaný peptid LAH4, který potencuje virovou infekci, může být využit jako transfekční agens a to sám o sobě nebo v kombinaci s virovými částicemi odovozenými od myšího polyomaviru a srovnat účinnost navržených přístupů s běžně dostupnými metodami transfekce na modelové buněčné linii Jurkat; 2) analyzovat vliv fosforylace virových struktur na účinnost transferu genů zprotředkovaných virovými částicemi |
| Preliminary scope of work in English |
| The diploma project will focus on optimizing experimental approaches that can be used for gene delivery in difficult-to-transfect cell lines (e.g. T-lymphocytes). The laboratory explores the potential of viral vectors derived from mouse polyomavirus and mouse papillomavirus as gene delivery tools and recently identified several factors (pH, phosphorylation of capsid proteins, specific peptides) that potentiate viral infection. The work will focus on the candidate antimicrobial peptide LAH4. The aims of the diploma project are:1) to verify that candidate cell-penetrating peptide LAH4 may be used as a transfection agent on its own or in combination with viral particles or viral assemblies, and compare the efficacy of gene transduction with commonly available methods of transfection on the model immortalized line of human T lymphocytes – Jurkat cells;2) to analyze the influence of phosphorylation of viral structures on efficiency of gene transfer mediated by viral particles. |