Cílem práce je připravit rekombinantní antigeny ve formě subvirových částic (VLP) na detekci druhově specifických protilátek proti polyomaviru BK (BKV) a rovněž pro průkaz specifických protilátek proti dvěma nejrozšířenějším subtypům BKV-I a BKV-IV. Rekombinantní antigeny pro jednotlivé subtypy BKV budou připraveny tak, že část variabilního úseku VP1(BC smyčka) jednotlivých subtypů BKV bude vložena místo homologního úseku do VP1 myšího polyomaviru. Smyslem těchto úprav je dosáhnout správného konformačního uspořádání antigenních determinant BKV subtypů na nosiči (VLPs odvozené od modelového zvířecího polyomaviru), o kterém je známo, že křížově nereaguje s lidskými séry. Antigeny budou produkovány pomocí bakulovirového expresního systému. Připravené antigeny by měly být validovány pomocí připravených experimentálních zvířecích sér a posléze i panelu klinických vzorků.
Preliminary scope of work in English
The aim of this thesis is to prepare recombinant antigens in form of virus-like particles (VLPs) for detection of species-specific antibodies against BK polyomavirus as well as for detection of subtype-specific BKV antibodies (for the most prevalent subtypes I and IV). Recombinant antigens for each BKV subtype is designed as VP1 of mouse polyomavirus with respective BKV subtype BC loop sequence inserted in the homologous region of MPyV. The purpose of these modifications is to achieve correct conformation of the BKV-subtype antigenic determinant presented on the carrier derived from animal model polyomavirus. Mouse polyomavirus is known not to cross-react with human sera. The modified antigen will be produced in baculovirus expression system. Prepared antigens will be validated using experimental rabbit sera as well as clinical samples of human sera.
- assigned by the advisor