Elektrochemický výzkum nových redoxních indikátorů pro detekci poškození DNA
Thesis title in Czech:
Elektrochemický výzkum nových redoxních indikátorů pro detekci poškození DNA
Thesis title in English:
Electrochemical Investigation of Novel Redox Indicatiors for Detection of DNA Damage
Key words:
nové redoxní indikátory, komplexy 1,10-fenantrolinu, ionty kobaltu, elektrochemické DNA biosenzory, diferenční pulzní voltametrie, stříbrná pevná amalgámová elektroda, detekce poškození DNA
English key words:
Novel Redox Indicators, 1,10-Phenanthroline Complexes, Cobalt Ions, Electrochemical DNA Biosensors, Differential Pulse Voltammetry, Silver Solid Amalgam Electrode, DNA Damage Detection
hidden - assigned by the advisor, waiting for guarantor's approval
Date of registration:
03.10.2017
Date of assignment:
06.10.2017
Date of electronic submission:
22.08.2018
Date of proceeded defence:
06.09.2018
Opponents:
RNDr. Jan Fischer, Ph.D.
Preliminary scope of work
Cílem této práce bylo zkoumání nových redoxních systémů, které by bylo možné využít pro detekci poškození DNA na rtuťovým meniskem modifikované stříbrné pevné amalgámové elektrodě (m-AgSAE). Jako slibné se nabízely komplexy 1,10-fenantrolinu (phen) a iontů přechodných kovů. Konkrétně byly provedeny pokusy s komplexy kobaltaných iontů a phen, jejichž příprava byla provedena slitím roztoků obou složek v příslušném poměru. Chování komplexů v této směsi bylo porovnáno se syntetizovaným komplexním kationtem [Co(phen)3]3+, a to jednak s využitím voltametrické techniky, jednak spektrofotometricky pomocí UV/VIS spektrofotometrie. Analýzy na m-AgSAE probíhaly s využitím techniky diferenční pulsní voltamerie (DPV) ve vodném prostředí. Jako základní elektrolyt byl zvolen 0,1 mol/dm3 KCl, který poskytoval nejširší potenciálové okno v katodické oblasti potenciálů. Nízkomolekulární DNA z lososího spermatu byla využita v následujícím modifikační kroku pro vytvoření modifikované elektrody. Poškození DNA bylo provedeno vystavením takto připraveného biosenzoru UV-C záření o vlnové délce 256 nm. Poškozená DNA naadsorbovaná na m-AgSAE byla testována pomocí DPV v elektrochemické cele obsahující ionty Co2+ nebo komplex Co2+ a phen, obojí o koncentraci 1·10–3 mol/dm3. Na získaných voltamogramech byla sledována potenciální interakce těchto indikátorů a poškozené DNA a výsledek byl porovnán s výsledky interakce indikátorů s nepoškozenou DNA. Komplexy Co2+ s phen neposkytly příznivé výsledky, naopak jako slibné se jeví samotné ionty Co2+, pomocí nichž bylo možné sledovat poškození DNA UV-C zářením, jehož míra závisela na době ozařování.
- assigned by the advisor, waiting for guarantor's approval