Studium dělení buněk Trichomonas vaginalis pomocí expanzní imunofluorescenční mikroskopie

• Název práce v češtině: Studium dělení buněk Trichomonas vaginalis pomocí expanzní imunofluorescenční mikroskopie
• Název v anglickém jazyce: Study of cell division of Trichomonas vaginalis using expansion immunofluorescence microscopy
• Klíčová slova: parazit, Trichomonas vaginalis, expanzní mikroskopie
• Akademický rok vypsání: 2024/2025
• Typ práce: diplomová práce
• Jazyk práce: čeština
• Ústav: Katedra parazitologie (31-161)
• Vedoucí / školitel: prof. RNDr. Jan Tachezy, Ph.D.

Předběžná náplň práce

Trichomonas vaginalis je dobře známý a významný parazit člověka. Přesto o způsobu dělení buněk tohoto prvoka je velmi málo informací. Jádro se dělí velmi neobvyklým způsobem: během mitózy zůstává zachovaná jaderná membrána a vytváří se extranukleární vřeténko. Kinetochorové mikrotubly vřeténka jsou patrně navázány na chromosomy přímo na jaderné membráně. Trichomonády mají rovněž bohatý tubulinový cytoskeleton. Centrem buňky procházi struktura axostylu, který se zatím neznámým způsobem duplikuje při dělení buňky.
Pomocí expanzní fluorescenční mikroskopie s využitím palety protilátek budeme sledovat dělení cytoskeletonu, interakce mezi kinetochorovými mikrotubuly a centromerami chromosomů, interakci mezi hydrogenosomy a cytoskeletonem a tvorbu cytoskeletárních struktur v dceřiných buňkách. K tomuto studium budeme využívat jak standardní kmeny T. vaginalis, tak kmeny, které exprimují značené rekombinantní proteiny. Metody, které toto studium zahrnuje: axenická kultivace prvoků, základní a vysokorezoluční fluorescenční mikroskopie, základní metody molekulární biologie - PCR, klonování, exprese rekombinantních proteinů, bioinformatika.

Předběžná náplň práce v anglickém jazyce

Trichomonas vaginalis is a well-known and important human parasite. Nevertheless, there is very little information about the cell division of this protist. The nucleus divides in a very unusual way: during mitosis, the nuclear membrane is preserved and an extranuclear spindle is formed. The kinetochore microtubules of the spindle are probably attached to the chromosomes directly on the nuclear membrane. Trichomonads also have a tubulin-rich cytoskeleton. Axostyl is a central microtubular structure, which is duplicated in an as-yet unknown way during cell division.
Using expansion fluorescence microscopy and a variety of antibodies, we will monitor the division of the cytoskeleton, the interaction between kinetochore microtubules and the centromeres of chromosomes, the interaction between hydrogenosomes and the cytoskeleton, and the formation of cytoskeletal structures in daughter cells. For this study, we will use both standard strains of T. vaginalis and strains that express labeled recombinant proteins. Methods that this study includes: axenic cultivation of protozoa, basic and expansion high-resolution fluorescence microscopy, basic methods of molecular biology - PCR, cloning, and expression of recombinant proteins.